引物探針問題 怎樣消除引物二聚體( 二 )


問:如何防止或消除污染?
1.使用干凈的工作臺,用含有核酸降解試劑的溶液擦拭工作臺 。
2.使用含有dUTP和UDG的反應預混物降解預聚合酶鏈反應的產物,防止預聚合酶鏈反應的污染 。
3.嘗試用新的反應管更換不同來源的試劑,找出有問題的試劑 。
4.如果條件允許,在不同的實驗位點建立反應,特別是當質粒用作對照時(質粒容易擴散,難以去除) 。
實時熒光定量 PCR 分析優化過程確實需要時間,但是所花的時間是值得的 。這樣得出的分析結果不僅具有最高的靈敏度和最大的動態范圍,而且準確度高、效率高、重復性好,為實驗提供可靠的數據 。

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