如何選擇二抗——根據一抗種屬及類型選擇合適的二抗求解( 二 )


第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結合 。第二抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體 。主要用于檢測抗體的存在 。一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體 。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體 。
【一抗的種屬來源】
二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是從兔血清里制備的兔源多克隆抗體,則相應的二抗需要選擇抗兔的二抗 。
即根據一抗的物種來源選擇相應的抗該物種的二抗 。艾美捷能為您提供最全的抗不同種屬的原裝進口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、綿羊、人、豚鼠、豬、馬、牛、雞、鴨等二抗 。
【二抗的種屬來源】
【如何選擇二抗——根據一抗種屬及類型選擇合適的二抗求解】一般來說,不同的種屬來源與二抗的質量沒有必然的聯系,來源于山羊的二抗與來源于驢的二抗在一般的實驗里沒有太多的差別 。
然而在一些特殊的實驗里,如雙標實驗里,如果其中一個一抗是山羊來源的,一個是小鼠來源的,則相應的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗,這時候,二抗就不能選擇山羊或者小鼠來源的 。艾美捷有相應的驢來源的二抗,非常適合做類似雙標的免疫實驗 。
一抗一般選擇兔來源的抗體,兔來源的抗體要穩定一些,二抗是根據一抗來定的,而且比較便宜,一般抗兔、抗小鼠都會備一點 一抗選擇原則:
1.
先查一下該抗體的相關專業外文文獻,先看看前人一般選擇哪家公司的哪種抗體較多,且一定要根據期刊質量和圖片結果好壞綜合判斷,提供參考
2.
若未找到相關文獻或查到的文獻信息不詳等原因,也可以通過公司查找,如Santa Cruz、CST、abcam、chemicon、upstate、millipore等知名品牌公司 。其中磷酸化抗體優先考慮CST公司
3.
種屬反應性的選擇(species reactivity):對應抗體適合檢測哪種種屬動物體內的抗原,如Mouse、Rat、Human等 。
4.
應用范圍的選擇:是用于Western blotting,或免疫組化IHC、免疫熒光IF

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