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膠體金檢測方法

膠體生活百科


膠體金檢測方法

文章插圖
膠體金檢測方法如下：
膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態，形成帶負電的疏水膠溶液，由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態，故稱膠體金 。
膠體金在弱堿環境下帶負電荷，可與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合，由于這種結合是靜電結合，所以不影響蛋白質的生物特性 。
膠體金除了與蛋白質結合以外，還可以與許多其它生物大分子結合，如SPA、PHA、ConA等 。
由于膠體金具備這個特性，所以常用來檢測，所以成為了一種檢測方法，用膠體金法命名 。比如嗎啡檢測試紙（膠體金法）的原理：本品采用膠體金免疫層析技術，將嗎啡抗原包被在硝酸纖維薄膜上，在玻璃纖維上包被膠體金標記的特異性抗體 。
在檢測時，如樣本中沒有嗎啡或其代謝產物存在，膠體金標記的特異性抗體與膜區抗原結合形成兩條紅線（一條反應線T，一條質控線C），表明檢測結果為陰性；
【膠體金檢測方法】如樣本中存在嗎啡或其代謝產物，而且濃度高于檢測水平（300ng/ml）時，毒品分子就與膠體金標記的抗體競爭結合，從而阻止膠體金標記的抗體與膜區抗原結合，使其對應的紅色反應線消失，僅出現一條紅色的質控線，表明檢測結果為陽性 。
金溶膠又稱膠體金，是金鹽被還原成金單質后形成的穩定、均勻、呈單一分散狀態懸浮在液體中的金顆粒懸浮液 。金溶膠顆粒由一個金原子及包圍在外的雙離子層構成 。
溶膠的顏色取決于分散相物質的顏色、分散相物質的分散度和入射光線的種類，是散射光線還是透射光，粒子越小，分散度越高，則散射光的波長越短 。對同一種物質的水溶膠來說，粒子大小不同，呈現的顏色亦不同 。
如膠體金顆粒在5～20nm之間，吸收波長520nm，呈紅色的葡萄酒色；20～40nm之間的金溶膠主要吸收波長530nm的綠色光，溶液呈深紅色；60nm的膠體金溶膠主要吸收波長600nm的橙黃色光，溶液呈藍紫色 。一般應用于免疫組織化學的膠體金顆粒為5～60nm范圍內，溶液呈現紅色 。
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擴展資料：
常用的免疫膠體金檢測技術：
1、免疫膠體金光鏡染色法細胞懸液涂片或組織切片，可用膠體金標記的抗體進行染色，也可在膠體金標記的基礎上，以銀顯影液增強標記，使被還原的銀原子沉積于已標記的金顆粒表面，可明顯增強膠體金標記的敏感性 。
2、免疫膠體金電鏡染色法可用膠體金標記的抗體或抗抗體與負染病毒樣本或組織超薄切片結合，然后進行負染 ?？捎糜诓《拘螒B的觀察和病毒檢測 。斑點免疫金滲濾法
3、應用微孔濾膜（如膜）作載體，先將抗原或抗體點于膜上，封閉后加待檢樣本，洗滌后用膠體金標記的抗體檢測相應的抗原或抗體 。
4、膠體金免疫層析法將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結合墊上，當待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后，通過毛細作用向前移動 。
溶解結合墊上的膠體金標記試劑后相互反應，當移動至固定的抗原或抗體的區域時，待檢物與金標試劑的結合物又與之發生特異性結合而被截留，聚集在檢測帶上，可通過肉眼觀察到顯色結果 。該法現已發展成為診斷試紙條，使用十分方便 。
參考資料來源：/baike.baidu.com/item/%E9%87%91%E6%BA%B6%E8%83%B6"target="_blank"title="網頁鏈接">百度百科——金溶膠
抗原檢測膠體金法原理解釋如下：
膠體金溶液是指分散相粒子直徑在l—150 nm之間的金溶膠，屬于多相不均勻體系，顏色呈桔紅色到紫紅色．膠體金作為標記物用于免疫組織化學始于1971年,Faulk等應用電鏡免疫膠體金染色法(IGS)觀察沙門氏菌,此后他們把膠體金與多種蛋白質結合.1974年Romano等將膠體金標記在第二抗體（馬抗人IgG）上，建立了間接免疫膠體金染色法 。
1978年geoghega發現了膠體金標記物在光鏡水平的應用 。膠體金在免疫化學中的這種應用，又被稱為免疫金．之后，許多學者進一步證實膠體金能穩定又迅速地吸附蛋白質，而蛋白質的生物活性無明顯改變．它可以作為探針進行細胞表面和細胞內多糖、蛋白質、多膚、抗原、激素、核酸等生物大分子的精確定位,也可以用于日常的免疫診斷，進行免疫組織化學定位 。

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