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什么是RNase

生活百科核糖核酸


什么是RNase

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Rnase：即RNA水解酶
包括幾種,RNase A和RNase H
RNase H是一種核糖核酸內切酶,它能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵,故能分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈.該酶不能消化單鏈或雙鏈DNA.
RNase A是一種被詳細研究和具有廣泛應用的核酸內切酶.RNase A 對RNA有水解作用,但對DNA則不起作用.RNase A在C端和U端殘基處專一地催化RNA的核糖部分3'-與5' -磷酸二酯鍵的裂開,形成具有 2',3'-環磷酸衍生物寡聚核苷酸.可以用來去除DNA制品中的污染RNA.
指能水解RNA磷酸二酯鍵的酶稱核糖核酸酶（ribonuclease，RNAse） 。不同的RNAse其專一性不同，例如牛胰核糖核酸酶（RNAse I） 。
它的作用位點是嘧啶核苷3’一磷酸與其他核苷酸之間的連接鍵，而核糖核酸酶T1（RNAse T1）的作用位點是3’鳥苷酸與其他相鄰核酸之間的5’一OH間的連鍵 。
核糖核酸酶A的主要用途為
1、從DNA：RNA雜交體中去除未雜交的RNA區 。
2、確定RNA或DNA中的單堿基突變的位置 。在RNA：DNA或RNA：RNA雜交體中，若存在單堿基錯配，可用RNAse A識別并切割 。通過凝膠電泳分析切割產物的大小，即可確定錯配的位囂 。
3、RNA檢測 。RNA酶保護分析法（RNAse protection assay）是近年來發展起來的一種檢測RNA的雜交技術 。
其基本原理是利用單鏈RNA探針，與待測的RNA樣品進行雜交形成RNA：RNA雙鏈分子，由于RNA酶可專一性地降解未雜交的單鏈RNA，而雙鏈受到保護不被降解，經凝膠電泳可以確定目的RNA的長度 。
該方法靈敏度較Northern雜交法更高，并可進行較為準確的定量 。選擇適當的探針，還可進行基因轉錄起始位點分析及內含子（也稱內元）剪切位點分析等研究 。此法的靈敏度比核酸酶S1保護分析法高數倍 。
4、降解DNA制備物中的RNA分子 。須使用無DNAsd的RNAse（DNase I free RNAse），市售的一般RNAse A常含有DNAse，可在100 retool/I Tris—CI（pH 7．5）和15 mmol/l 。NaCI溶液中100℃加熱15 min，以去除之 。
廠家網頁上有，最佳60，在15-70度都有活性
【什么是RNase】http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/docs/Sigma/Datasheet/5/r5500dat.Par.0001.File.tmp/r5500dat.pdf

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