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瓊脂糖凝膠電泳，瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA( 二 )

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在緩沖液中加入EDTA，可以鰲合二價離子，抑制DNase，保護DNA 。
緩沖液pH常偏堿性或中性，此時核酸分子帶負電，向正極移動 。
核酸電泳中常用的染色劑是溴化乙錠（ethidium?bromide?EB） 。溴化乙錠是一種扁平分子，可以嵌入核酸雙鏈的配對堿基之間 。在紫外線照射BE-DNA復合物時，出現不同的效應 。
254nm的紫外線照射時，靈敏度更高，但對DNA損傷嚴重；360nm紫外線照射時，雖然靈敏度較低，但對DNA損傷小，所以適合對DNA樣品的觀察和回收等操作 。300nm紫外線照射的靈敏度較高，且對DNA損傷不是很大，所以也比較適用 。
使用溴化乙錠對DNA樣品進行染色，可以在凝膠中加入終濃度為0.5μg/ml的EB 。EB摻入DNA分子中，可以在電泳過程中隨時觀察核酸的遷移情況，但是如果要測定核酸分子大小時，不宜使用以上 *** ，而是應該在電泳結束后，把凝膠浸泡在含0.5μg/mlEB的溶液中10～30min進行染色 。BE見光分解，應在避光條件下4℃保存 。
參考資料：百度百科-瓊脂糖凝膠電泳
參考資料：百度百科-凝膠電泳
3瓊脂糖凝膠電泳的原理是什么？瓊脂糖凝膠電泳是以瓊脂糖為介質，對不同大小的DNA 或 RNA 實現分離的一種電泳 ***。瓊脂糖是一種多糖，具有親水性，但是不帶電荷 。
使得 DNA 在堿性條件下使其帶負電荷（pH8.0 的緩沖液），在電流作用下，以瓊脂糖凝膠為介質，由負極向正極移動，根據不同的 DNA 分子片段的大小和形狀不同，在電場中泳動的速率也不相同，同時在樣品中加入染料能夠和DNA 分子間形成絡合物，經過紫外照射，可以看到 DNA 的位置，從而達到分離、鑒定的目的 。
瓊脂糖凝膠電泳注意事項
底板一定要用膠帶封緊，否則灌膠時凝膠會漏出 ?？梢栽诠嗄z時先倒少量凝膠在交界處，利用凝固的凝膠將其封緊 。
梳子一定不能插到底部，應距離底部1-2mm，否則拔梳子時容易弄破凝膠，導致漏膠，加熱時應注意不要讓瓊脂糖沸騰得太厲害，稍稍沸騰至溶液清涼，即其全部溶解即可，過度沸騰會導致凝膠實際濃度的提高 。
將凝膠放入電泳槽時要注意極性，不要正負極顛倒 。要注意撕去兩端的封帶，凝膠的濃度與待分離的DNA的大小有關 。一般濃度為1%，低濃度的膠特別易碎，要注意 。

瓊脂糖凝膠電泳，瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA

文章插圖
【瓊脂糖凝膠電泳，瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA】文章到此結束，希望可以幫助到大家 。

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