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紫外分光光度計的基本原理及其適用性 紫外-可見分光光度計的基本原理

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紫外-可見分光光度計的基本原理
紫外-可見分光光度法是利用物質的分子或離子對某一波長范圍的光的選擇性吸收作用，對物質進行定性、定量及結構分析的一種光學分析方法 。物質對光的吸收遵循朗伯-比耳定律：當一束單色光通過溶液時，溶液的吸光度（ A ）與溶液組成標度（ c ，摩爾濃度或 ρ ，質量濃度）和液層厚度（ b ）的乘積成正比 。其數學表達式為
A ＝ εbc 或 A ＝ abρ
式中 ε 或 a 為吸光系數，在特定波長和溶劑一定的情況下，是吸光質點（分子或離子）的特性常數 。
由于吸光物質對單色光具有選擇性的吸收，在測量時應選擇具有最大吸收波長（ λ max ）的光為入射光，以提高測量的靈敏度 。通過作吸收曲線的方法可找出最大吸收波長 。方法是在一定波長范圍內，將不同波長的光分別通過一定組成標度的溶液，記錄其在每一個波長下對應的吸光度 A 。然后以波長為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制 A-λ 曲線，即吸收曲線 。曲線上峰值對應的波長即為最大吸收波長 λ max。
定量分析中，常用的測量方法有標準曲線法、標準對比法和吸光系數法等 。其中標準曲線法應用較為廣泛 。方法是測量一系列已知準確濃度的標準溶液的吸光度，作 A-c 或 A-ρ 曲線，再測量樣品的吸光度，根據該吸光度值即可從標準曲線上查得被測溶液的相應濃度 。
【紫外分光光度計的基本原理及其適用性 紫外-可見分光光度計的基本原理】常用的紫外-可見分光光度計有722型、722S型、WFJ7200型可見分光光度計及751-G型、UV-Vis 8500型紫外-可見分光光度計等 。

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