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JINPRES薔薇果水養保濕乳 jinpres

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JINPRES薔薇果水養保濕乳 jinpres

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【JINPRES薔薇果水養保濕乳jinpres】中草藥Chinese Tr aditional and Her bal Drugs裹作用, 使得醇沉物中留有較大量的靛玉紅。研究 結果表明, 板藍根醇沉物具有明顯的清熱解毒作用, 并對大腸桿菌、 金黃色葡萄球菌等的生長均有明顯 的抑 *** 用, 其作用強度與同劑量板藍根顆粒劑前 浸膏相當 。板藍根醇沉物中靛玉紅的量明顯高于 板藍根顆粒劑前浸膏, 說明板藍根醇沉物中含有一 定的藥理活性物質 。對原料及成品的主要成分進行比較可以看出, 產品的含氮量明顯高于原料 。作為飼料添加劑, 既含 有大量的蛋白質, 菌體中又富含維生素、 多種酶及輔 助因子等成分, 可為動物生長提供豐富的營養 。同 時, 醇沉物經過發酵后有效成分靛玉紅的質量分數 仍然高達 0. 45 Lg/ g, 殘留的靛玉紅也可發揮清熱 解毒的作用 。醇沉物中的糖分以多糖為主, 而多數微生物只 能以小分子的單糖、 雙糖作為碳源, 因此需要對其中 的多糖進行水解, 成為可發酵性糖 。多糖水解分為酶 水解和酸水解兩種, 考慮到酸水解條件比較劇烈, 溫 度高, 時間長, 所需 pH 值在 1. 5～1. 8, 水解結束后 調節 pH 值會帶入較多的金屬離子, 不利于菌體的 生長, 因此選擇條件較溫和的雙酶法進行水解 。高質量濃度的還原糖對酵母菌生長具有抑 ***用, 應當將發酵液初始還原糖質量濃度控制在 5% 以下 。在對數生長后期, 隨著菌體的大量繁殖, 發酵 液中還原糖等營養物質被耗盡, 有害代謝產物不斷 積累, 使得菌體的生長速率下降 。為了提高培養液中 的菌體數, 可在對數生長后期, 采用分批補料或流加 補料的方式, 向發酵液中補加還原糖, 以延長菌體的 對數生長期, 從而獲得高密度培養液 。我國是中草藥種植、 生產加工和消費的大國, 近 年來隨著對中藥資源開發力度的不斷加大, 中藥材 加工產生的廢棄物也越來越多 。這些藥渣中的絕大 多數均作為廢料被扔掉或燒毀, 這其中有尚未提取 完全的有效成分及未開發的新用途 。本研究中探討 了利用板藍根醇沉物培養益生菌的 *** , 不僅有效 解決了污染問題, 并且使原料資源得到了更充分合 理有效的利用, 提高了產品的附加值, 同時為采用相 R efer ences :Zhang R Z, Zhang Y W. T he res earch ing progress of indigowoad root [ J ] . Chin Tr adi t H erb Drug s ( 中草藥) , 2000, 31 ( 6) : 474-476.Sun P , L i Y , Gu C Z , et al . Microwave ext ract ion and content det erm inat ion of Glycyr rhiza ural ensis Fis ch . pol ysacch aride [ J ] . Pri mary J Chi n Mater M ed ( 基層 中藥雜志) , 2001, 15 ( 6) : 22-23.T ianjin Ins t it ut e of Light Indu st ry, Wuxi Inst it ut e of Light Indus t ry. Ind ustr ial F erment ati on Analysis ( 工 業 發 酵 分 析 ) [ M ] . 2nd ed . Beijing: China L ight Indu st ry Press , 1997.Du L X. T echnol ogy of Ind ustr ial M icrobiology ( 工業 微生物 技術) [M ] . T ianji n: T ianjin Science and T echnol og y Pres s, 1992.Sun T S. Cont roll ing fact ors of microorgan ic met abolis m during fermen tat ion [ J ] . Chi n Cond iment ( 中 國 調味 品 ) , 1994 ( 10) : 2-5.Hu ang J , Huang L . Improvem ent of ext ract ion process of indigowoad root g ranu le [ J ]. West Ch ina J P harm Sci ( 華西藥 學雜志) , 1999, 14 ( 5-6) : 381-382.Xu Q T , Du G J, Lin H H. Phar macological st udy on alcoh ol deposit of Rad ix I satid is [J ] . Chi n H osp P harm J ( 中國醫院 藥學雜志) , 2003, 23 ( 10) : 587-589. 似工藝進行生產的其他中藥的綜合利用提供參考 。
桑葉中多糖提取分離工藝的研究，優選 桑葉多糖提取分離更佳工藝 。***比較稀酸、 稀堿、 蒸餾水 3 種提取 *** , 采用 L 9 ( 3 4 ) 正交試 驗, 對影響多糖的水提 取工藝和醇沉分離 工藝的因素水 平進行了 研究, 并 比較了不 同蛋白去除 法對多糖 提取分離 的影響 。結果　桑葉多糖的更佳提取工藝為用 10 倍量蒸餾水 在 70 ℃下提取 2 次, 每次 1. 5 h 。醇沉分離更佳工藝 為醇沉時乙醇體積分數 80% , 藥液濃縮至 1 mL 藥液/ g 生藥, pH 值 為 4 。用三 氯乙酸( T CA) 法去除 蛋白質的效果 優于傳統的 Savage 法 。結論　優選的桑葉多糖提取分離工藝穩定可行 。
桑葉, 又名“ 鐵扇子”為桑科植物桑 Morus al ba , L. 的葉, 是藥食兩用的中藥, 始載于《 神農本草經》 , 味苦、 性寒, 歸肺、 甘, 肝經, 具有疏風清熱、 平肝明目 的功效 。歷代中醫藥書籍中記載桑葉能夠治療消渴 癥, 現代藥理研究表明桑葉多糖具有顯著的降血糖 作用, 對大鼠四氧嘧啶型糖尿病有治療效果表明葡萄糖在 20～100 Lg/ mL 與吸光度呈良好 的線性關系 。2. 2. 3　測定: 精密稱取桑葉多糖提取物 50 mg, 加 水適量使溶解, 蒸餾水定容至 50 mL 量瓶中, 搖勻 。精密吸取 1 mL , 按 2. 2. 2 項下操作, 測定吸光度值, 計算多糖的質量分數 。的提取液( m) , 置于已干燥至恒重的蒸發皿中( m0 ) , 至室溫, 迅速精密稱定質量( mi ) , 按公式( mi - m0 ) / m×100% 計算浸膏得率 。2. 4　多糖提取工藝的優選 ,因 此提取多糖成分開發降糖新藥和功能性食品具有重 要的學術意義和實用價值 。本實驗對桑葉不同提取 工藝所得多糖進行了比較, 采用正交試驗法確定最 佳水提取和醇沉分離工藝, 并比較了不同 *** 去除 蛋白質的效果, 為生產提供依據 。1　材料和儀器桑葉購于天津市安舜大藥房, 所用試劑均為國 產分析純 。752 型紫外-可見分光光度計( 上海光譜 儀器有限公司) , R—201 旋轉蒸發器( 上海公司) , pHS—3C 精密 pH 計( 上海雷磁儀 器 廠 ) , ALPHA 1—2 真 空 冷 凍 干 燥 機 ( 德 國 CHRiST 公司) , F A / IA 型電子天平( 上海精密科學 儀器有限公司)。2*** 和結果 2. 1　原料預處理: 將桑葉粉碎、 過篩, 加入一定體積 95% 乙醇, 使溶液中乙醇的體積分數達到 80% , 回 流 4 h, 間隙攪拌 ?；亓魍戤? 離心分離取濾渣, 濾渣 風干, 備用 。2. 2　桑葉多糖的測定 2. 2. 1　對照品溶液的制備: 精密稱取葡萄糖對照品 ( 105 ℃干燥至恒重) 100 mg , 置于 100 mL 量瓶中, 加水適量使溶解, 稀釋至刻度, 搖勻 。精密吸取 10 mL 置于 100 mL 量瓶中, 加水稀釋至刻度, 即得 。2. 2. 2　標準曲線的繪制: 準確吸取葡萄糖對照品溶 液 0. 05、 10、 20、 30、 40、 60、 80 mL, 用 0. 0. 0. 0. 0. 0. 蒸餾水補到 1. 00 mL 。分別加入 4. 00 mL 0. 2% 蒽 酮- *** 試劑, 迅速浸于冰水浴中冷卻, 各管加完后 一起浸于沸水浴中, 管口加蓋玻璃球, 以防蒸發 。自 水浴重新煮沸起, 準確煮沸 10 min 取出, 自來水冷 卻, 室溫放置 10 min 左右 。以同樣處理的重蒸水為 空白, 于 620 nm 處測定 。以吸光度值為縱坐標, 葡 萄糖質量濃度為橫坐標, 繪制標準曲線, 計算得回歸 方程: Y= 0. 092 19+ 6. 546 38 X , r = 0. 999 75, 結 2. 3　浸膏得率的測定: 采用重量法 。精密量取等量 水浴濃縮干, 于 105 ℃干燥 3 h, 移至干燥器中, 冷卻 2. 4. 1　不同提取 *** 比較: 稱取桑葉 50 g , 分別加 入 0. 3 mol/ L 稀鹽酸溶液、 5 mol / L 稀氫氧化鈉 0. 溶液、 蒸餾水, 恒溫水浴中進行浸提, 離心后取上清 液, 減壓濃縮后加入 95% 乙醇醇沉, 離心取沉淀, 將 沉淀用無水乙醇、 無水乙醚、 丙酮洗滌, 真空冷凍干 燥, 得桑葉多糖粗品, 測定多糖的質量分數 。各自在 為提取劑, 浸提混合物濃稠, 不易離心, 加入乙醇后, 相同的條件下重復操作 3 次, 結果見表 1 。以稀堿作 溶液無明顯絮狀沉淀, 沉淀物不能被徹底離心, 所得 沉淀物呈黏性半溶液狀 。稀酸浸提混合物也比較黏 稠, 所得粗多糖的質量分數較低 ?？赡苁且驗橄∷?、 稀堿易使多糖發生糖苷鍵的斷裂, 使部分多糖發生 質量分數也高, 故以蒸餾水作為提取劑 。表 1　提取 *** 的比較 ( n = 3) Ta ble 1　Compa rison of extr acting methods ( n= 3)提物劑稀 HC l稀 NaOH蒸餾水 多糖/ ( mg·g- 1 ) 0. 95 1. 73 1. 97 水解 。而采用蒸餾水作為提取劑較易操作, 粗多糖的 2. 4. 2　蒸餾水提取條件的優選: 影響水提取多糖工 藝的因素很多, 通過預備試驗選擇 4 個主要因素: 加 ( D) , 每個因素各取 3 個水平( 表 2) , 在平行操作下, 4 水 量( A ) 、 提取 時間( B) 、 提取溫度 ( C) 、 提取次 數 按 L 9( 3 ) 正交試驗, 以多糖的質量分數、 干浸膏得率 為提取效果的評價指標對水提取工藝條 件進行優 化, 結果見表 3 。對結果進行統計學處理, 方差分析 結果見表 4 ?！?536· 中草藥Chinese Tr aditional and Her bal Drugs第 36 卷第 4 期 2005 年 4 月 表 2　工藝優化的因素水平 Table 2Factors and levels of optimum technology 水平 A/ 倍 1 2 3 8 10 12 4 A ( 加水量) > D( 提取次數) > C( 提取溫度) , B 因素 影響差異也有顯著性, 直觀分析表明桑葉多糖的質 因　素 B/ h 0. 5 1. 0 1. 5 C/ ℃ 70 80 90 D/ 次 1 2 3 量分數更高的工藝為 A 2B3C1, 2 D2。綜合上述兩項考 察指標, 由于對干膏得率 A 2 與 A 3 相差不大, 同時 應以桑葉多糖的質量分數為主要指標, 故確定更佳 提取工藝 為 A 2B3 C1D2 , 即加 水 10 倍量, 提取時 間 表 3　L 9 ( 3 ) 正交試驗結果 Table 3Result of L 9 ( 3 ) or thogonal test 4 1. 5 h, 提取溫度 70 ℃, 提取次數 2 次 。2. 5　醇沉條件的優選: 影響醇沉效果的主要因素有 - 1) 編號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 K1 K2 K3 干 膏 k1 得 k2 率 k3 R SS K1 K2 多K 3 糖k1k2k3 R SS A 1 1 1 2 2 2 3 3 3 35. 96 38. 04 38. 28 11. 99 12. 68 12. 76 0. 77 1. 08 4. 23 5. 36 3. 79 1. 41 1. 79 1. 26 0. 53 0. 44 B 1 2 3 1 2 3 1 2 3 27. 40 43. 88 41. 00 9. 13 14. 63 13. 67 5. 50 51. 64 3. 39 4. 93 5. 06 1. 13 1. 64 1. 69 0. 56 0. 58 C 1 2 3 2 3 1 3 1 2 42. 20 37. 56 32. 52 14. 07 12. 52 10. 84 3. 23 15. 62 4. 57 4. 57 4. 24 1. 52 1. 52 1. 41 0. 11 0. 02 D 1 2 3 3 1 2 2 3 1 38. 16 38. 32 35. 80 12. 72 12. 77 11. 93 0. 84 1. 32 4. 22 4. 72 4. 44 1. 41 1. 57 1. 48 0. 16 0. 04 浸膏得率 多糖 Yi/ Xi/ % 10. 48 14. 48 11. 00 8. 84 13. 44 15. 76 8. 08 15. 96 14. 24 ( m g· g 1. 01 1. 69 1. 53 1. 46 1. 79 2. 11 0. 92 1. 45 1. 42 乙 醇 體積 分 數( A ) 、 液的 濃 縮程 度 ( B) 、 值 藥 pH ( C)。以蒸餾水為提取劑, 采用水浸提更佳工藝提取 多糖, 以上述 3 個因素為考察因素, 每個因素各取 3 個水平( 表 5) , 在平行操作條件下, 按 L 9( 34) 正交設 計試驗, 以多糖的質量分數作為醇沉效果的評價指 表 5　醇沉條件的因素水平 Table 5　F actor s and levels of alcohol precipitation 水平 1 2 3 因　素 A/ % 80 70 60 B/ ( mL 藥液·g- 1 生藥) 1 2 3 C pH 值 8 6 4 標( 表 6)。對結果進行統計學處理, 得方差分析( 表 7)。2 Xi= 112. 28 (2 X i) 2 / 9= 1 400. 76 表 6　L 9 ( 34 ) 正交試驗結果 Table 6　Result of L9 ( 34 ) or thogonal test 2 Yi= 13. 38 ( 2 Yi ) 2/ 9= 19. 89 編 號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 F值 顯著性 K1 K2 K3 k1 k2 k3 R A 1 1 1 2 2 2 3 3 3 11. 57 8. 42 7. 74 3. 86 B 1 2 3 1 2 3 1 2 3 10. 13 9. 32 8. 28 3. 38 8. 64 9. 25 9. 84 2. 88 C 1 2 3 2 3 1 3 1 2 D( 誤差) 1 2 3 3 1 2 2 3 1 9. 03 9. 35 9. 35 3. 01 3. 12 3. 12 0. 11 0. 023 0 多糖 Xi / ( mg· g- 1 生藥) 3. 88 3. 92 3. 77 3. 14 2. 96 2. 32 3. 11 2. 44 2. 19 2 Xi = 27. 73 CT= ( 2 Xi ) 2/ 9= 85. 44 表 4　方差分析 Table 4Var ia nce*** ysis 方差來源 浸膏 得率 A( 誤差) BCDABC( 誤差) D離差平方和 自由度 方差 1. 08 51. 64 15. 62 1. 32 0. 44 0. 580. 0240. 042 2 2 2 2 2 2 2 2 0. 54 25. 82 47. 81 P < 0. 05 7. 81 14. 46 0. 66 1. 22 0. 22 18. 33 0. 29 24. 17 P < 0. 050. 0120. 021 1. 75 多糖 2. 81 2. 58 1. 28 SS 2. 783 8 3. 11 3. 08 2. 76 3. 28 0. 62 0. 40 0. 573 4 0. 240 0 表 7　方差分析 Table 7Var iance a na lyis 方差來源 ABCD( 誤差) 離差平方和 2. 783 8 0. 573 4 0. 240 0 0. 023 0 自由度 2 2 2 2 方差 1. 391 9 0. 286 7 0. 120 0 0. 012 0 F 值 顯著性 116. 00 P < 0. 01 23. 90 P < 0. 05 10. 00F 0. 05 ( 2, 2) = 19　F 0. 01 ( 2, 2) = 99分析可知, 以浸膏得率為評價指標, 各因素對提 取效果的影響程度依次為 B( 提取時間) > C( 提取溫 度 ) > D( 提取次數) > A( 加水量) , B 因素影響差異 有顯 著性, 直 觀分析表 明浸膏 得率最 高的工 藝為 A 3B2C1D 2; 以桑葉多糖 的質量分數為評價 指標, 各 因素對提取效果的影響程度依次為 B( 提取時間) >F 0. 05 ( 2, 2) = 19　F 0. 01 ( 2, 2)= 99結果分析可知, 以多糖的質量分數為評價指標, 中草藥Chinese Tr aditional and Her bal Drugs第 36 卷第 4 期 2005 年 4 月 ·537· 各因素對醇沉效果的影響程度依次為 A ( 乙醇體積 分數) > B( 藥液濃縮程度) > C( pH 值) , A 因素影響 差異有高度顯著性, B 因素影響差異有顯著性, 直觀 分析表明多糖的質量分數更高的工藝為 A 1B1C3 , 即 醇沉時乙醇體積分數為 80% , 藥液濃縮至 1 mL 藥 液/ g 生藥, 藥液 pH 值為 4 。2. 6驗 證 試 驗: 據 篩 選 所 得 最 佳 提 取 工 藝 A 2B3C1D 2 和更佳醇沉工藝 A 1B1C3, 進行正交驗證試 驗, 得桑葉多糖質量分數為 4. 05 mg/ g 生藥( n= 3)。2. 7　不同蛋白去除法對多糖提取的影響: 醇沉時與 多糖一起沉淀下來的蛋白質對多糖測定值及純度產 生很大的影響, 一般采用 Savage 法除去蛋白質, 蛋 白 質總 去除 率 可達 89. 47% , 但同 時 多糖 損 失達 37. 62% ( 表 8) , 且有大量不溶于水的顆粒沉淀物產 生和粗多糖顏色較深, 不利于粗多糖的進一步純化 。采用三氯 乙酸( T CA) 法代替 Savage 法, 一次去除 蛋白質后, 上清液中蛋白質就降至 Savage 法 5 次除 蛋白的結果, 此時多糖的損失率僅為 12. 87%。實驗 中還發現, 采用 TCA 法處理后溶液中的色素隨著 蛋白質的沉淀而部分除去 ?？梢娪?T CA 法去除蛋 白質的效果優于傳統的 Savage 法 。3　討論 3. 1　桑葉多糖的提取中, 原料的預處理用 80% 乙 醇回流, 目的是為了除去桑葉中單糖、 雙糖、 低聚糖、 苷類、 生物堿、 氨基酸及醇溶性蛋白質等物質 。表 8Savage 法與 TCA 工藝參數比較 Table 8　Compar ison of Sava ge and TCA method par ameter參　數蛋白去除率/ %多糖損失率/ %色素去除溶劑用量 Savage 法 89. 47 37. 62 無明顯減少 正丁醇、 氯仿消耗量大 T CA 法 97. 25 12. 87 隨蛋白去除而大量去除 少量三氯乙酸水溶液 3. 2　桑葉多糖的水提取和醇沉分離是不同的工藝 過程, 故對水提取和醇沉分離分別采用正交試驗來 獲得更佳水提取工藝和醇沉分離工藝是有必要的 。經過驗證, 優選的桑葉多糖提取分離工藝穩定可行 。3. 3　水提醇沉是多糖提取中較常用的 *** , 本實驗 優化了水提取工藝和醇沉分離 。目前一些新技術、 新*** 如超聲提取技術、 微波萃取技術、 酶法等也用于 多糖的提取分離中, 因此有必要采取這些新技術、 新*** 提取桑葉多糖并與傳統 *** 相比較 。

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