稀釋涂布平板法是什么?


稀釋涂布平板法是什么?

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該法是將已熔化并冷卻至約50℃(減少冷凝水)的瓊脂培養基,先倒入無菌培養皿中,制成無菌平板 。待充分冷卻凝固后,將一定量(約0.1?ml)的某一稀釋度的樣品懸液滴加在平板表面,再用三角形無菌玻璃涂棒涂布,使菌液均勻分散在整個平板表面,倒置溫箱培養后挑取單個菌落 。
【稀釋涂布平板法是什么?】計數時,首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細胞分散開,使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞),再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布于平板中的培養基內 。
微生物平板涂布法有以下注意事項:
1、整個過程需要保證在無菌條件下進行 。試管、槍頭等儀器設備都需要提前經過滅菌環節才可以使用 。
2、接種環使用前應當在酒精燈上灼燒至紅熱,以保證灼燒充分 。
3、蘸取少量菌液,先在培養皿上劃第一條,注意不要轉動接種環 。
4、在稀釋過程中要充分混勻,吸取100ul到平板上,然后用燒好的涂布棒均勻涂抹開,各個方向都可以涂布,涂布完灼燒 。
澆注平板法又稱為稀釋倒平板法,與涂布平板法的主要區別如下:
一、方法不同
1、稀釋倒平板法:先將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面,進行培養 。在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個的菌落 。
2、涂布平板法:首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細胞分散開,使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表一個細胞),再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布于平板中的培養基內 。經培養后,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可計算出樣品中的含菌數 。
二、優勢不同
1、稀釋倒平板法:便于計數,便于觀察菌落特征 。
2、涂布平板法:便于觀察菌落特征,對混合菌進行分離 。
三、劣勢不同
1、稀釋倒平板法:吸收量較少,平板不干燥效果不好,易蔓延 。
2、涂布平板法:不能準確計數 。
參考資料來源:
百度百科-稀釋倒平板法
百度百科-涂布平板法
稀釋平板計數是根據微生物在固體培養基上所形成的單個菌落,即是由一個單細胞繁殖而成這一培養特征設計的計數方法,即一個菌落代表一個單細胞 。
計數時,首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液,盡量使樣品中的微生物細胞分散開,使成單個細胞存在(否則一個菌落就不只是代表 一個細胞),再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中,使其均勻分布于平板中的培養基內 。經培養后,由單個細胞生長繁殖形成菌落,統計菌落數目,即可計算出樣品中的含菌數 。
稀釋涂布平板法注意事項
稀釋涂布平板法是將菌液稀釋成不同濃度,進行涂平板 。平板劃線法,是調單個菌落在平板上進行劃線 。兩種方法都可以得到獨立的菌株 。稀釋涂布平板法一般多用于篩選菌株,平板劃線法一般多用于純化菌株 。
微生物學實驗中的一種操作方法 。由于將含菌材料現加到還較燙的培養基中再倒平板易造成某些熱敏感菌的死亡,而且采用稀釋倒平板法也會使一些嚴格好氧菌因被固定在瓊脂中間缺乏氧氣而影響其生長,因此在微生物學研究中更常用的純種分離方法是稀釋涂布平板法 。

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